光線作為一種重要的環(huán)境因素,對細胞培養(yǎng)過程有著復雜而多樣的影響。在細胞培養(yǎng)實驗中,了解并控制光線條件,對于維持細胞的正常生長、繁殖以及保證實驗結果的準確性和可靠性至關重要。
一、光線對培養(yǎng)基成分的影響
光線會直接作用于細胞培養(yǎng)基中的某些成分,特別是B族維生素(如B2、B12)和芳香族氨基酸(如色氨酸、酪氨酸)。這些成分在光照條件下會發(fā)生光化學轉化和光降解,導致培養(yǎng)基的性狀、性能及儲存有效期發(fā)生改變。例如,色氨酸在光照下會降解產(chǎn)生犬尿氨酸等小分子物質,這些降解產(chǎn)物可能具有潛在的細胞毒性。此外,維生素B12在光照下會轉化為羥鈷胺素,進而影響抗體產(chǎn)物的顏色,導致藥物原液和藥物產(chǎn)品顏色異常。
二、光線對細胞生長和繁殖的影響
光線不僅影響培養(yǎng)基成分,還會直接影響細胞的生長和繁殖。長時間、高強度的光照,特別是藍光和白光,會對細胞造成光氧化損傷,減弱細胞的增殖活力,甚至改變細胞的正常形態(tài)。實驗證實,手機屏幕等人造光源的長期照射也會引起體外培養(yǎng)細胞的損傷。此外,光照還可能通過影響細胞培養(yǎng)體系中的其他成分來間接影響細胞,如抑制褪黑素的分泌,干擾細胞的正常生理節(jié)律。
三、光線對細菌生長和細胞培養(yǎng)體系平衡的影響
在細胞培養(yǎng)過程中,光照還可能促進某些細菌的生長,這些細菌對光照敏感,過度生長會干擾到其他有用微生物的生長,破壞細胞培養(yǎng)體系的平衡。這種干擾可能導致細胞生長環(huán)境的惡化,影響細胞的正常生長和繁殖。
四、光線對植物細胞組織培養(yǎng)的影響
與動物細胞不同,植物細胞在組織培養(yǎng)過程中對光照有一定的需求。在再分化階段,植物細胞需要光照以形成葉綠體,進行光合作用。然而,在愈傷組織形成階段,避光培養(yǎng)更有利于形成大量的愈傷組織。光照強度、光照時間以及光照周期等因素都會影響植物細胞的生長和分化。
五、應對措施
為了減少光線對細胞培養(yǎng)的不利影響,可以采取以下措施:
物理避光:在培養(yǎng)基制備、運輸儲存及細胞培養(yǎng)過程中,采用物理避光措施,如使用鋁箔紙包裹和遮蓋生物反應器的透明或半透明罐體。
安全照明燈:在安裝照明燈時,選擇能夠濾除具有破壞性波長的光的安全照明燈,如紅光、綠光或波長大于500nm的其他彩色光。
培養(yǎng)基組分優(yōu)化:在培養(yǎng)基中添加抗氧化劑,,以緩解光照引起的氧化應激程度。同時,適當調整培養(yǎng)基中高氧化性組分和光反應性成分的含量。